课 程 名 称

微生物生态学实验

课程性质

专业基础

实验技术人员

王世强

职     称

实验师

授 课 方 式

多媒体辅助教学

考试方式

实验操作及实验报告

教        材

土壤微生物生态学及其实验技术

出 版 社

科学出版社

年 级

2016级

授课

专业

生态学

人数

26

学 时

18

周学时

3

周

日  期

实验内容及所用药品和仪器

教 师

7

基础实验一   土壤丝状真菌（腐霉菌）活菌数量的测定

实验内容：分离微腐霉菌的步骤和方法，土壤稀释，平板培养，菌落计数，高压蒸汽灭菌，紫外线灭菌等

药品和仪器：铁铲，封口袋（采土样），三角瓶，摇床，玻璃涂布器、灭菌平皿、培养箱，高压蒸汽灭菌锅，玉米粉琼脂培养基，制霉菌素（Nystatin,10mg/ml），氨苄青霉素(Ampicillin,250mg/ml)，利福平(Rifampicin,10mg/ml)，咪康唑(Miconazole Nictrate,1mg/ml)，琼脂，   DMSO

李明珠

基础实验二   土壤微生物DNA的提取

实验内容： 掌握土壤总DNA提取原理方法

药品和仪器：冷冻离心机直径1mm玻璃珠，2ml旋盖离心管，漩涡仪（votex- genie 2，带24孔盘）

李明珠

基础实验三    随机扩增多态性DNA分析（RAPD）

实验内容：了解并掌握RAPD-PCR技术原理

药品和仪器： 1.5ml离心管，PCR管，TE缓冲液，PCR仪，Taq酶，dNTP, 随机引物等

李明珠

基础实验四   琼脂糖凝胶电泳及RAPD数据分析

实验内容： 掌握琼脂糖凝胶电泳原理方法及RAPD数据分析方法

药品和仪器：琼脂糖，无毒核酸染料(生工)，DNA marker (takara 100bp   ladder),电泳仪，50X   TAE缓冲液；凝胶成像系统；Gel-Pro   analyzer软件，NTsys   2.10e软件，office软件，电脑等

李明珠

基础实验五   土壤微生物呼吸强度的测定

实验内容： 掌握密闭静置培养测CO₂法的原理方法

药品和仪器：氢氧化钠，盐酸，氯化钡，酚酞指示剂，无水乙醇；

培养三角瓶500mL， 滴定三角瓶100mL，橡皮塞，细铜丝，吸收瓶20mL，自动滴定仪

李明珠

基础实验六   土壤微生物活性测定-FDA水解酶分析

实验内容： 掌握FDA水解酶分析法测定环境微生物活性的原理

方法

药品和仪器：FDA（二乙酸酯），丙酮，荧光素钠，磷酸盐缓冲液，氯仿，甲醇；紫外-可见光分光光度计，离心机，恒温箱，天平，移液枪，土铲，无菌样品瓶，无菌离心管

李明珠

综合实验一  不同土壤中主要类群微生物数量与总DNA含量的

关系比较分析

李明珠

综合实验二  土壤腐霉菌密度与土壤微生物呼吸强度的关系研究分析

李明珠

综合实验三  不同土壤微生物活性的差异比较分析

李明珠

综合实验四  不同土壤微生物群落遗传多样性的比较分析

李明珠